病毒载体是科研工作者最常用的载体工具，目前最常用的有四类病毒载体慢病毒（lentivirus，LV），腺病毒（ Adenovirus，AV）腺相关病毒（Adeno-associated virus，AAV） 以及逆转录病毒（ retrovirus），其中，慢病毒，腺病毒以及腺相关病毒在基因治疗领域的应用越来越广泛。
慢病毒由人类免疫缺陷（Human immunodeficiency virus,HIV）病毒改造而成，基因组大小9.2kb,由于安全性等因素，慢病毒目前已经发展至第三代四质粒系统，也就是海星生物正在使用的质粒系统；AAV属于微小病毒科，为单链的DNA病毒，有发卡区域，可以保护病毒载体在细胞内长期存在，不整合到基因组。腺病毒为线性双链DNA病毒，免疫原性高于慢病毒，表达时间快，1-2天即可有较好的表达。
下面是小海星为大家整理的三种病毒的区别以及优劣势：
| 慢病毒 | 腺病毒 | AAV | |
| 病毒基因组 | ssRNA | dsDNA | ssDNA |
| 组织嗜性 | 广泛 | hAd5只感染表达CAR受体的细胞 | 取决于血清型 |
| 是否可感染非分裂细胞 | 是 | 是 | 是 |
| 病毒基因组稳定整合抑 或游离于宿主基因组 | 稳定整合 | 游离的DNA附加体形式 | 游离的DNA附加体形式 |
| 插入片段大小 | 6.4kb | 7.5kb | 4.2kb |
| 自定义启动子 | 是 | 是 | 是 |
| 滴度 | 10^8-10^9 TU/mL | 10^12PFU/mL | 10^12-10^13GC/mL |
| 外源基因表达时间 | 2-4天开始表达，长期稳定表达 | 1-2天开始表达，作用时间2周左右 | 7-14天开始表达，稳定表达3-6个月 |
| 体内免疫反应 | 低 | 高 | 非常低 |
| 应用 | 细胞实验和体内实验 | 原代细胞，体内实验 | 体内实验 |
| 慢病毒（LV） | 腺病毒（AV） | 腺相关病毒（AAV） |
| 优势： ● 永久整合到基因组中，便于稳转株的构建，持续传代 ● 宿主广，对多种细胞系有广泛的嗜亲性，包抱分裂和不分裂的细胞 ● 生物安全性高 ● 免疫原性低，适用于动物体内实验 | 优势： ● 病毒滴度高 ● 外源基因承载量较大，-38.7kb(5`ITR to 3`ITR). 可用7.5kb左右 ● 生物安全性高 ● 宿主细胞较广泛，可感染分裂和非分裂细胞 ● 对于原代细胞具有很好的感染特性 | 优势： ● 安全性高：迄今从未发现野生型AAV对人 体致命，重组AAV基因组序列上去除了大部分的野型AAV基因组元件，进一步保证了安全性 ● 表达时间长 ● 免疫原性低 ● 特异性强，具体数十种血清型。 ● 物理性质稳定：在60℃不能被灭活，能抗氯仿 ● 滴度高 |
| 劣势： ● 病毒承载量有限：可用6.4kb; 无包膜， 易失活 | 劣势： ● 病毒基因组不整合，分裂细胞中会丢失 ● 某些类型细胞感染效果差 ● 免疫原性强，动物中可能引起免疫反应 | 劣势： ● 容量较小，ITR之间4.7kb.可用4.2kb |
还有大家关注的AAV血清型和组织噬性，小海星也给大家做了整理，海星生物有十几种的血清型，例如外周神经系统 AAV-PHP.S更适用于外周神经系统，肝脏常用AAV8，AAV在组织中的转导效果可以持续3-6周，并且通常在注射后2-4周可以达到表达峰值。
看到这里，大家现在应该知道怎么选择合适的病毒载体进行病毒包装，从而为您的科研达到最理想的实验效果。
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