| 产品说明书
| 产品简述
在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。
HyCyteTM 胰蛋白酶-EDTA消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶和 0.04%EDTA,溶于平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品使用方便、稳定安全。大多数贴壁细胞室温消化1~2 min就可以完成消化。
| 使用说明
· 贴壁细胞的消化:
1) 去除培养液,用预热后的无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
2) 加入少量预热的胰蛋白酶-EDTA消化液,覆盖细胞即可,室温放置 1~2 min。
注意:不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
3) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用移液器吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时,终止消化,去除消化液。加入适量含血清的细胞培养液(需提前预热),吹打细胞,即可直接用于后续实验。
注意:如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶-EDTA 消化液重新消化。
建议可添加2倍胰蛋白酶-EDTA用量的完全培养基用于于终止消化。
4) 250 g离心5 min以沉淀细胞。
5) 去除离心后的上清,加入含血清的完全培养液重悬细胞,即可用于后续实验。
· 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
| 保存条件
-20℃长期保存,有效期 18 个月。注意:不宜 4℃长期保存,忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存。
| 注意事项
1)由于组织或细胞性质不同,技术人员应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过
长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;
2)本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染;
3)本产品仅用于科研实验,不可用于临床治疗。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。