小干扰siRNA常见FAQ

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小干扰siRNA常见FAQ

siRNA 小干扰是什么？

siRNA指一类长约21-23nt（从文献报道看，19-25nt都是可以的）的双链RNA分子，一般3’端有两个游离的碱基，通过RNA干扰途径沉默目标基因。

siRNA介导的RNA干扰机制是什么？

RNAi首先将较长的双链 RNA 加工和切割成 siRNA（可以直接体外合成siRNA），通常在每条链的 3'末端带有 2 个核苷酸突出端，负责这种加工的酶是一种RNase III酶，称为Dicer。siRNA与一种称为RNA诱导的沉默复合物（RNAinduced silencing complex, RISC）的多蛋白组分复合物结合。在RISC复合物中，siRNA链被分离，具有更稳定的5′末端的链通常被整合到活性RISC复合物中。然后，反义单链siRNA组分引导并排列在靶mRNA上，并通过催化RISC蛋白（Argonaute family（Ago2）），使mRNA被切割。

siRNA 3′端突出的dTdT有什么作用？

一般情况下，3′端的2 个碱基使用突出的dTdT（deoxythymidine dinucleotide）取代，能够增强siRNA 双链复合体的稳定性，进而增加siRNA的敲低效率，一般情况下，序列合成公司会自动增加dTdT结构。

siRNA转染的时候需要用什么转染试剂？

转染试剂使用脂质体即可，可以使用lipo2000或lipo3000。

siRNA什么价格? 货期多久? 交付什么？

海星siRNA三保一活动是980元，货期1-2周；交付：3条目的基因siRNA(每条2 OD)，阴性对照siRNA(1 OD)，FAM标记阴性对照siRNA(1 OD)，阳性对照siRNA(1 OD)

小干扰siRNA(3保1)套装980.jpg

siRNA三保一是什么？如果三条siRNA效果都不好怎么办，有售后吗？

三保一：承诺转染效率≥90%的情况下，保证至少1条序列mRNA水平干扰效率≥70%。如果三条都达不到干扰效果的话，我们会帮客户再免费设计并合成三条siRNA。

小干扰交付是什么呢，作用时间多久？

siRNA小干扰交付的是化学合成的RNA,以干粉形式交付；siRNA是瞬时干扰，不整合到目的细胞的基因组上，本质是RNA，比较容易降解，建议转染后24-48h 检查基因水平的变化，48-72h 检测蛋白水平的变化。（不同的基因半衰期不同，siRNA干扰是抛物线形的，可以多设计几个时间点检测干扰效果）

干扰的效率一般是多少？

干扰效率一般是50-70%，这个是由技术本身决定的，干扰只是在RNA水平上对基因实现敲降，会有部分RNA仍然表达，目前我们的是保证至少一条的干扰效率是70%。

收到货怎么保存呢，有效期是多久？

产品以冻干粉的形式常温运输。收到产品后,请于-20℃~-80℃保存,冻干粉可以稳定保存一年。如果已经加水溶解的话，请尽快使用。

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海星980套装赠送对照的作用是什么？

套装中共有三个对照：一个带FAM 的阴性对照、一个是普通的阴性对照、一个是阳性对照；FAM-NC是为了观察转染效率，以便调整实验参数；NC是为了说明靶点的特异性，一般操作熟练的话只需要做NC对照即可。阳性对照是验证实验的有效性，可用来确认实验方法及试剂是否出现问题（这个一般都不需要做）。

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